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用于毛细管电泳分离DNA的新型准互穿网络/金纳米粒子复合介质的合成及其DNA测序性能研究
用于毛细管电泳分离DNA的新型准互穿网络/金纳米粒子复合介质的合成及其DNA测序性能研究
资料类型:
PDF文件
关键词:
毛细管电泳
DNA测序
准互穿网络
金纳米粒子
复合筛分介质
资料大小:
290K
所属学科:
分子表征
来源:
2007年全国高分子学术论文报告会(10.9-10.13,成都)
简介:
DNA的分离和测序是揭开遗传密码的关键。毛细管电泳成为分析带电生物大分子(如DNA和蛋白质)最重要的技术之一。筛分介质是毛细管电泳分离DNA研究过程中的一个重要研究内容。在众多被广泛研究的聚合物介质中,高分子量的线形聚丙烯酰胺(LPA)具有较高的测序能力和较长的读取长度。然而,LPA溶液粘度很大且无自涂敷功能,因此需要对毛细管内壁进行预涂敷。与之相反,聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)表现出优良的自涂敷功能,但是其测序能力较差。尽管已研制和测试了大量聚合物溶液用作DNA筛分介质,但是没有一种均聚物能完全满足所有的应用要求。因此,寻求低粘度、具有高筛分能力和自涂敷能力的聚合物介质仍是DNA高效分析的重要课题。然而研制和测试一种新的介质通常需要花费大量的时间和精力。近年来,向现有的低粘度聚合物溶液中加入某种添加剂(如多羟基化合物、蒙脱土、金纳米粒子等)经证明是一种非常有效且简单的克服毛细管注入难题和改善DNA分离性能的方法。尽管用于双链DNA(dsDNA)分离的多种添加剂在过去的几年里引起了较多关注,但是用于单链DNA(ssDNA)测序的添加剂的研究还比较少。王延梅等人合成了一种由极高分子量LPA(9.9MDa)和PDMA构成的非交联的准互穿网络(quasi-IPN),用作DNA测序介质,该介质同时具有LPA的高筛分能力及PDMA的自涂敷能力。但高分子量LPA粘度太高且在缓冲溶液中易于降解。基于DNA的分离机理及前人的研究,我们试图将金纳米粒子加入quasi-IPN(含相对较低分子量LPA)中形成聚合物/金属复合介质,充分利用GNPs与聚合物链之间的相互作用来稳定筛分介质网络、增加聚合物的表观分子量,从而改善DNA的测序性能。利用毛细管电泳详细研究了各种参数对ssDNA测序性能的影响。
作者:
周丹 杨润苗 王延梅
上传时间:
2007-11-23 14:42:40
下载次数:
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